0 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Сдать анализ на leptospira днк пцр

Leptospira spp. (лептоспироз), ДНК (ПЦР), качественный, моча

Лептоспиры (Leptospira species) — грамотрицательные аэробные спирохеты, которые вызывают инфекции, передающиеся от домовых и полевых грызунов и домашних животных (выделяют возбудителя с мочой,фекалиями). Восприимчивость людей к инфекции высокая, но заболевание распространяют только животные. Люди заражаются через слизистые желудочно-кищечного тракта, поврежденную кожу. Лептоспироз протекает с волнообразной лихорадкой, интоксикацией, желтухой (лептоспиры поражают капилляры печени), развитием почечной недостаточности (повреждение капилляров почек), менингитом (повреждение капилляров центральной нервной системы).

Данный анализ позволяет определить наличие ДНК лептоспир в моче. Анализ помогает в диагностике лептоспироза.

Метод

Метод ПЦР – полимеразная цепная реакция, позволяющая идентифицировать наличие в биологическом материале искомый участок генетического материала.
Подробнее о методе ПЦР — его разновидностях, преимуществах и области применения в медицинской диагностике.

Референсные значения — норма
(Leptospira spp. (лептоспироз), ДНК (ПЦР), качественный, моча)

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

Leptospira, ДНК [ПЦР]

Общая информация об исследовании

Начиная со второй недели заболевания лептоспиры накапливаются преимущественно в извитых почечных канальцах и исчезают из крови и других тканей. Такая избирательная концентрация в эпителии и межклеточном пространстве почечной ткани приводит к тяжелым повреждениям канальцев почек и нарушению мочеобразования, а в тяжелых случаях вызывает анурию (отсутствие мочеиспускания) и уремию (накопление в крови токсических продуктов азотистого обмена, нарушение концентрации электролитов крови и др.).

При персистенции лептоспир в почках признаков острой инфекции, как правило, нет, заболевание часто протекает в латентной форме.

Решающими для подтверждения диагноза «лептоспироз» в любой фазе заболевания, в том числе и на более поздних сроках инфекционного процесса, являются результаты лабораторных исследований: бактериологического (посева), серологического (определения титров специфических антител в сыворотке крови), молекулярно-генетического (определения ДНК лептоспир методом ПЦР).

Недостатком бактериологического метода является длительность проведения исследования из-за медленного роста лептоспир на питательных средах.

Серологическое исследование теряет свою значимость после 19-20-го дня болезни в связи с постепенным снижением титра сывороточных антител вследствие прекращения циркуляции лептоспир в крови. Кроме того, при тяжелом течении лептоспироза, особенно на фоне интенсивной терапии антибактериальными препаратами, антитела могут выявляться лишь спустя 2-3 месяца от начала болезни.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это молекулярно-генетический метод исследования, в ходе которого выявляется генетический материал (ДНК) лептоспиры в образце биоматериала. Методу свойственна высокая специфичность (100 %), чувствительность (от 10 до 1000 копий ДНК в пробе) и высокая диагностическая эффективность, даже на фоне проводимого лечения антибактериальными препаратами.

Одним из основных достоинств ПЦР является то, что она позволяет выявить возбудителя даже при условии присутствия последнего в организме в очень малых количествах.

Читать еще:  Сдать анализ на chlamydia trachomatis igм

Вместе с тем отрицательный результат ПЦР не должен быть основанием для прекращения диагностики, так как определить точно конкретную фазу заболевания не всегда возможно. Чувствительность лабораторной диагностики при лептоспирозах может быть значительно повышена за счет параллельного использования серологических тестов (определения титров антител в сыворотке крови) и метода ПЦР вне зависимости от фазы заболевания.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики лептоспироза.
  • Для дифференциальной диагностики лептоспироза с другими заболеваниями.

Когда назначается исследование?

  • При диагностике лептоспироза.
  • При подозрении на персистенцию лептоспир в почках.

ПЦР-диагностика лептоспироза

Лептоспирозная инфекция занимает одно из первых мест среди болезней, общих для человека и животных по тяжести клинического течения, частоте летальных исходов и отдаленных клинических последствий. Возбудитель лептоспироза — спирохета Leptospira interrogans, единственный представитель рода Leptospira. Выделяют паразитические (патогенные) и сапрофитные (непатогенные) геновиды лептоспир.

Лабораторная диагностика лептоспироза может проводиться серологическим, микроскопическим, молекулярно-генетическим и микробиологическим методами. Растут лептоспиры медленно, рост их обнаруживается на 5-7-й день.

Согласно СП 3.1.7.2835-11 «Профилактика лептоспирозной инфекции у людей», диагноз лептоспироза у человека считают установленным при лабораторном подтверждении подозрительных на заболевание случаев любым из существующих методов, включая молекулярно-генетический, или подтвержденном случае лептоспироза у контактного животного, или выделением лептоспир из водоема, с которым доказана эпидемиологическая связь заболевания.

Наиболее перспективными для диагностики лептоспироза на ранних стадиях заболевания являются молекулярно-генетические методы диагностики, прежде всего, позволяющие выявлять рибосомальную РНК (рРНК лептоспир). Циркуляция в крови рРНК отражает активное размножение бактерий, поэтому обнаружение в биологическом материале рРНК в полной мере отражает остроту заболевания и как нельзя более подходит для диагностики в остром периоде. Кроме того, выделение из биологического материала пациента ДНК возбудителя не может в полной мере служить доказательством активного инфекционного процесса в связи с возможной циркуляцией ДНК микроорганизма в течение нескольких недель после окончания острого периода заболевания и проведенного лечения. Определение специфической рибосомальной 16S РНК лептоспир также обеспечивает высокую диагностическую чувствительность теста (на первой неделе заболевания — до 86%).

Реагенты для выявления лептоспироза

Набор реагентов АмплиСенс® Leptospira-FL предназначен для выявления только патогенных геновидов лептоспир в биоматериале от людей и животных. Реакции обратной транскрипции и ПЦР совмещены в одном этапе (one step), что обеспечивает простоту и высокую скорость анализа.

Биоматериалы: от людей (кровь, спинномозговая жидкость), аутопсийный материал (ткани мозга, почек, печени, мезентериальные лимфоузлы, ткани легких), полевой материал и материал от павших животных (ткани мозга, легких, почек животных); у животных с острой формой инфекции следует исследовать кровь, у животных с персистенцией лептоспир в почках — мочу.

Для гомогенизации тканей внутренних органов животных и аутопсийного материала рекомендуется использовать гомогенизаторы TissueLyser LT или TissueLyser II.

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген f76 альфа лактальбумин ige ифа

Дополнительно используется набор реагентов для экстракции РНК/ДНК АмплиПрайм РИБО-преп.

Нормативные документы

СП 3.1.7.2835-11 Профилактика лептоспирозной инфекции у людей (Скачать)

Публикации

Клинические особенности и современная лабораторная диагностика лептоспироза серогруппы Grippotyphosa (Читать на сайте CMD)

Поддержка
Сервис
Информационные материалы
Специальные предложения8 (800) 100-28-84

Главный офис г. Москва
+7 (495) 664-28-84

Leptospira, ДНК [ПЦР]

Выявление возбудителя лептоспироза (Leptospira) – инфекционного заболевания, которому подвержены многие животные (в том числе собаки, кошки, домашний скот, крысы) и которое может передаваться человеку. Распространяясь с мочой и калом, микроскопического размера лептоспиры поражают органы и ткани, отравляя организм продуктами своей жизнедеятельности.

Лептоспира, ДНК [ПЦР] (моча).

Leptospira, PCR (DNA), Urine.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Первую порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Начиная со второй недели заболевания лептоспиры накапливаются преимущественно в извитых почечных канальцах и исчезают из крови и других тканей. Такая избирательная концентрация в эпителии и межклеточном пространстве почечной ткани приводит к тяжёлым повреждениям канальцев почек и нарушению мочеобразования, а в тяжёлых случаях вызывает анурию (отсутствие мочеиспускания) и уремию (накопление в крови токсических продуктов азотистого обмена, нарушение концентрации электролитов крови и др.). Лептоспирам свойственно длительно сохраняться в почках и выделяться с мочой до 40-го дня болезни.

При персистенции лептоспир в почках признаков острой инфекции, как правило, нет, заболевание часто протекает в латентной форме.

Решающими для подтверждения диагноза «лептоспироз» в любой фазе заболевания, в том числе и на более поздних сроках инфекционного процесса, являются результаты лабораторных исследований: бактериологического (посева), серологического (определения титров специфических антител в сыворотке крови), молекулярно-генетического (определения ДНК лептоспир методом ПЦР).

Недостатком бактериологического метода является длительность проведения исследования из-за медленного роста лептоспир на питательных средах.

Серологическое исследование теряет свою значимость после 19-20-го дня болезни в связи с постепенным снижением титра сывороточных антител вследствие прекращения циркуляции лептоспир в крови. Кроме того, при тяжелом течении лептоспироза, особенно на фоне интенсивной терапии антибактериальными препаратами, антитела могут выявляться лишь спустя 2-3 месяца от начала болезни.

Также малоэффективна серологическая диагностика персистентных форм лептоспироза в связи с низким титром сывороточных антител и отсутствием его нарастания.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это молекулярно-генетический метод исследования, в ходе которого выявляется генетический материал (ДНК) лептоспиры в образце мочи. Методу свойственна высокая специфичность (100 %), чувствительность (от 10 до 1000 копий ДНК в пробе) и высокая диагностическая эффективность, даже на фоне проводимого лечения антибактериальными препаратами.

Определение ДНК лептоспир в моче методом ПЦР используется для диагностики лептоспироза на более поздних сроках заболевания – начиная с конца второй – начала третьей недели заболевания, то есть в период, когда лептоспиры располагаются преимущественно в извитых канальцах почек и исчезают из крови и тканей, а также при персистенции лептоспир в почках. Одним из основных достоинств ПЦР также является то, что она позволяет выявить возбудителя даже при условии присутствия последнего в организме в очень малых количествах.

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген f284 мясо индейки ige immunocap

Вместе с тем отрицательный результат ПЦР не должен быть основанием для прекращения диагностики, так как определить точно конкретную фазу заболевания не всегда возможно. Чувствительность лабораторной диагностики при лептоспирозах может быть значительно повышена за счет параллельного использования серологических тестов (определения титров антител в сыворотке крови) и метода ПЦР вне зависимости от фазы заболевания.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики лептоспироза на более поздних сроках инфекционного процесса (начиная с конца второй – начала третьей недели заболевания, когда лептоспиры накапливаются в извитых почечных канальцах и исчезают из крови и тканей).
  • Для дифференциальной диагностики лептоспироза с другими заболеваниями, для которых характерно поражение почек (ГЛПС, нефрозы и нефриты неинфекционной природы), развитие острой почечной недостаточности (нарушения мочеобразования, в тяжёлых случаях анурии и уремии).

Когда назначается исследование?

  • При диагностике лептоспироза.
  • При подозрении на персистенцию лептоспир в почках.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • лептоспирозная инфекция (фаза начала формирования нестерильного иммунитета – который сохраняется, пока в организме есть возбудитель инфекции, персистенция лептоспир в почках).

Причины отрицательного результата:

  • период полного выздоровления, когда формируется стойкий иммунитет и лептоспиры в организме уже отсутствуют.

Что может влиять на результат?

  • Применение некоторых противовирусных препаратов – ингибиторов полимераз – иногда приводит к ложноотрицательному результату.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, нефролог, уролог, терапевт, врач общей практики, хирург, реаниматолог.

Литература

  • Recommendations for the detection of Leptospirain urine by PCR «Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical» 37(2):131-134, mar-abr, 2004.
  • Ganoza, C.A., Matthias, M.A., Saito, M., Cespedes, M., Gotuzzo, E., & Vinetz, J.M. (2010). Asymptomatic renal colonization of humans in the Peruvian Amazon by Leptospira. PLoS Neglected Tropical Diseases, 4 (2) DOI.
  • World Health Organization (2003) Human Leptospirosis: Guidance for diagnosis, surveillance and control.
  • Эпидемиология, диагностика и профилактика заболеваний людей лептоспирозами. Методические указания МУ 3.1.1128-02.
  • Медицинская микробиология / под ред. В. И. Покровского, О. К. Поздеева. – М.: ГЭОТАР Медицина, 1999 и др. годы издания.
Подписка на новости

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

голоса
Рейтинг статьи
Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector