0 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Сдать анализ на ki маркер пролиферативной активности

Иммуногистохимическое исследование

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело.

При иммуногистохимическом исследовании используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами — антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей. Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.

По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате биопсии или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR). Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании, это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

1. ER / PR (Эстрогеновые и прогестероновые рецепторы, ER- еstrogen receptor, PR-progesterone receptor)

ER и PR — протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны — эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при раке молочной железы. Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию.

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким метастазированием.

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от до 10. Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

2. Her2Neu (от англ. Human Epidermal Growth Factor Receptor 2)

Her2Neu — это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это — ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего рак молочной железы, рак пищевода, рак желудка) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu, что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность химиотерапии, лучевой терапии, гормональной терапии. Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

  • 0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
  • 3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu.

Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu. Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются таргетные препараты Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб). Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.

3. Ki-67

Ki-67 — это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение. И наоборот — чем выше показатель Ki-67, тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

4. Белок p53

Белок p53 — это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген f93 какао igg

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке — активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется — индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53, определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту. Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию.

5. VEGF (Фактор роста эндотелия сосудов)

VEGF – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать. Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF — для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения таргетной терапии такими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

6. Определение экспрессии белков PD-1, PDL-1 и PDL-2

Иммунотерапия в онкологии появилась сравнительно недавно, но уже успела показать удивительные результаты в лечении опухолей. Механизм иммунотерапии рака заключается в том, что препарат позволяет иммунитету увидеть опухоль и уничтожить её. Ответственные за «видимость» опухоли белки PD-1, PDL-1 и PDL-2 в достаточном количестве присутствуют не во всех опухолях. Именно поэтому одним пациентам иммунотерапия помогает, а другим нет.

Чаще всего определение гиперэкспрессии белка PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2 необходимо при меланоме, немелкоклеточном раке легкого, раке желудка и раке почки.

Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ (FISH). При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.

Гистология: Пролиферативная активность экспрессии Ki-67

Иммуногистохимическое исследование пролиферативной активности по экспрессии Ki-67

Иммуногистохимическое исследование пролиферативной активности по экспрессии Ki-67 (1 антитело) проводится для выявления в организме человека активного опухолевого роста. Если рак уже был выявлен ранее, то методика позволит выяснить, насколько хорошо он будет реагировать на паллиативное лечение. Ki-67 — это белковая структура, которая находится в раковых клетках.

Экспрессия Ki-67 помогает выявить раковые клетки в активной фазе клеточного цикла (G1-, S-, G2- и M-фазы). Только в период G0 отсутствует Кi-67. Активно пролиферирующие раковые клетки представляют «фракцию роста» опухоли. Пролиферативная активность является показателем определения фенотипа новообразования, определяющая скорость роста опухоли, риск метастазирования и ответ на терапию. Изменение пролиферативной активности влияет на течение и исход онкологического заболевания.

Что такое индекс пролиферации?

Индекс пролиферации при исследовании экспрессии Ki-67— это цифровое значение степени активности опухолевой прогрессии. Выражается в процентном соотношении. Суть определения этого значения основана на том, что все онкологические структуры в организме имеют интенсивный рост и деление. Этот показатель намного выше, чем процессы пролиферации в других органах, причем не только в физиологическом состоянии, но и при воспалениях. Получается, что при значительном увеличении индекса пролиферации, в организме имеется активный злокачественный рост.

В то же время, при наличии опухоли, существуют референсные показатели для каждого онкологического заболевания. При превышении этого порога, рак будет плохо отвечать на консервативное лечение. Наоборот, если показатель низкий, то можно рассчитывать, что стабилизация болезни произойдет на фоне специфической неоперативной терапии.

Когда проводят иммуногистохимическое исследование?

Показаниями к проведению иммуногистохимического исследования пролиферативной активности по экспрессии Ki-67 являются:

  • рак любой локализации;
  • подозрение на наличие опухолевого роста в организме;
  • множественные доброкачественные образования с целью исключения озлокачествления;
  • опухоль молочной железы для оценки возможности лечения гормонами.

Анализ пролиферативной активности

Материалом для иммуногистохимического исследования пролиферативной активности служит биоптат любого ракового образования. Если опухоль только предполагается, то берется один кусочек с каждого подозрительного участка. Необходима прямая биопсия. Проводится либо щипцами, либо секторальной резекцией части органа. Пункционный биоптат не пригоден.

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген i2 шершень ige

Материал заливают формалином, отправляют в гистологическую лабораторию. Готовится стандартный препарат с помощью микротомирования после парафинизации. Он фиксируется на предметном стекле и окрашивается маркером для определения белка Ki-67. В результате окрашивания белок становится отличим от других тканей. Врачу-гистологу под микроскопом предстоит подсчитать количество окрашенных фрагментов.

Расшифровка анализа

Заключение врача является важной информацией для лечащего специалиста. Первый вопрос, на который даст ответ гистолог — есть или нет экспрессия Ki-67.

Если окрашивание не произошло, то ответ отрицательный. Опухоли в организме нет.

При положительном варианте проводится подсчет окрасившихся клеток по сравнению с неокрашенными. Результат умножается на 100 и выражается в процентах. Этот показатель врач также включает в ответ. Показатели процентной активности для каждой опухоли индивидуальные, но чем выше процентное соотношение, тем агрессивнее новообразование.

90-69-712. Индекс пролиферативной активности Ki 67 (выполняется дополнительно к исследованию 90-69-702; 90-69-502)

Биоматериал: Биоптат в ЖТС (полость матки)/ Смешанный соскоб из цервикального канала (эндо + экзоцервикс)

Срок выполнения (в лаборатории): 10 р.д. *

Описание

Выполняется дополнительно к исследованию 90-69-702; 90-69-502.

Цитологическое исследование эндометрия проводят с целью выявления признаков нарушения пролиферации эндометрия и воспалительных процессов. Клиническая цитология — метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала ( эндометрия). Исследование проводят для получения ответа о наличии или отсутствии злокачественного новообразования, определить характер патологического процесса и выявить предраковые диспластические поражения, воспалительные изменения и доброкачественные опухоли. Ki -67 это маркер пролиферативной активности, который является прогностическим фактором, по которому можно определить вероятность возникновения рецидива.

Показания к назначению

  • гиперплазия эндометрия/цервикального канала (по данным ультразвукового исследования);
  • дисфункциональное маточное кровотечение, в том числе и в постменопаузе;
  • диагностика злокачественных и доброкачественных новообразований, воспалительных процессов.

Подготовка к исследованию

  • При взятии материала из полости матки, условия подготовки определяются лечащим врачом. У женщин с менструальным циклом биоматериал рекомендуется брать на 25-26-й день менструального цикла. У женщин пре- и постменопаузального возраста — в любое время.
  • При взятии материала из цервикального канала ( смешанный соскоб ), условия подготовки определяются лечащим врачом. У женщины репродуктивного возраста необходимо брать мазки не ранее, чем на 5-й день менструального цикла. И не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. Не следует брать биоматериал в течение 24-48 часов после полового акта, санации влагалища, использование местных лекарственных препаратов, после проведения УЗИ, кольпоскопии.

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Заключение по исследуемому материалу выдается врачом.

Взятие биоматериала проводится квалифицированным врачом.

* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

Ki-маркер пролиферативной активности

Исследование цитологических препаратов эпителия шейки матки, проводимое с использованием меченных флюоресцирующими веществами антител, которое позволяет выявить наличие и оценить степень присутствия на атипичных клетках специфичного маркера активности процессов клеточного деления.

Маркер пролиферации ki-67, оценка экспрессии онкопротеина ki-67 иммуноцитохимическим методом.

Marker Of Proliferation Ki-67, proliferation-related Ki-67 antigen, Ki-67 immunocytochemistry in liquid based cervical cytology.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Аспират из полости матки.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Одна из отличительных особенностей клеток злокачественных опухолей — способность к неограниченному делению, которое является основным фактором их биологической агрессивности. Процесс деления сопровождается появлением в клетке определенных белков, один из которых – ki-67. Он не продуцируется в клетках в состоянии покоя, что позволяет использовать его в том числе как маркер злокачественной трансформации. Исследование количества белка ki-67 в опухолевых клетках используется в диагностике и определении прогноза большинства злокачественных новообразований, в том числе его можно проводить в процессе скрининга на рак шейки матки.

Введение научно обоснованных программ скрининга позволило значительно снизить смертность от рака шейки матки, поэтому в настоящее время данный подход является одним из самых эффективных способов профилактики этого онкологического заболевания. Чаще всего скрининг включает в себя определение маркеров вируса папилломы человека (доказана связь рака шейки матки с ВПЧ-инфекцией) и цитологическое исследование. При этом диагностические возможности традиционного цитологического исследования весьма ограничены – по некоторым данным, его чувствительность составляет до 85%, он во многом лишен стандартизации, а достоверность результатов часто страдает по причине некачественного приготовления материала. В настоящее время золотым стандартом для диагностики патологии шейки матки считается метод жидкостной цитологии. Материал для исследования забирается цитощеткой, которая затем помещается в емкость со специальным консервирующим раствором. Он предотвращает преждевременное высыхание клеток, способствует сохранению их морфологических и молекулярно-биологических свойств, а также минимизирует содержание в образце постороннего материала (слизи, клеток периферической крови, элементов воспаления и разрушенных клеток). В дальнейшем с помощью специального оборудования изготавливается однослойный цитологический препарат, который врач-цитолог изучает под микроскопом. Характер патологических изменений, выявленных при цитологическом исследовании, оценивается в соответствии с общепринятой международной системой Bethesda – она представляет собой набор аббревиатур, используемых для обозначения цитологических заключений:

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген i70 рыжий муравей ige

NILM — Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy (отрицательные в отношении интраэпителиальных поражений или злокачественности — норма);

AGC — Atypical Glandular Cells (атипичные клетки железистого эпителия);

ASC-US — Atypical squamous cells of undetermined significance (атипичные клетки плоского эпителия неясного значения);

ASC-H — Atypical squamous cells cannot exclude HSIL (атипичные клетки плоского эпителия, не позволяющие исключить внутриэпителиальные поражения высокой степени злокачественности);

LSIL — Low-grade squamous intraepithelial lesion (внутриэпителиальные поражения низкой степени злокачественности);

HSIL — High-grade squamous intraepithelial lesion (внутриэпителиальные поражения высокой степени злокачественности);

AIS — Adenocarcinoma in situ (аденокарцинома in situ).

При выявлении по данным цитологического исследования интраэпителиальных изменений плоского эпителия низкой степени (LSIL), атипичных клеток плоского эпителия неясного значения (ASC-US) и атипичных клеток железистого эпителия (AGC) рекомендуется дополнительное обследование на содержание в атипичных клетках белка ki-67. Для анализа используется тот же материал, что и для жидкостной цитологии (однократное взятие биологического материала для исследования методом жидкостной цитологии позволяет проводить также и дополнительные диагностические исследования без повторных гинекологических манипуляций). Содержание белка ki-67 в атипичных клетках определяется с помощью иммуноцитохимического исследования. Для этого из взвеси клеток готовят мазки, которые затем окрашивают раствором антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичными к ki-67. Если в опухолевой клетке присутствует искомый белок, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежит в основе интерпретации результатов иммуноцитохимического анализа.

Для чего используется исследование?

  • Для выявления в атипичных клетках цервикального эпителия маркера пролиферативной активности, который позволяет с высокой вероятностью подтвердить или исключить злокачественную трансформацию.

Когда назначается исследование?

  • При выявлении по результатам цитологического исследования цервикального мазка определенных изменений (по классификации Bethesda): LSIL, ASC-US и AGC.

Что означают результаты?

В норме Ki‑67 определяется только в клетках нижних слоев плоского эпителия слизистой оболочки наружной части шейки матки. При дисплазии клетки, экспрессирующие Ki‑67, появляются в верхних слоях эпителия; данный маркер может экспрессироваться в значительной части клеток в очагах незрелой плоскоклеточной метаплазии.

Что может влиять на результат?

Соблюдение правильности техники взятия биологического материала для исследования.

  • При необходимости взятия биоматериала для нескольких исследований материал для данного анализа берется в первую очередь.
  • Исследование на ki-67 необходимо комбинировать с определением в атипичных клетках еще одного молекулярного маркера – белка р16 INK4 a . Именно их комбинация является высокочувствительным диагностическим методом. Белок р16 обладает антипролиферативной активностью, в нормальной клетке экспрессия ki-67 и р16 взаимно исключают друг друга. Выявление одновременной экспрессии в клетке и ki-67, и р16 свидетельствует о нарушении клеточного цикла и коррелирует с индуцированной вирусом папилломы человека злокачественной трансформацией.
  • Интерпретация результатов исследования должна проводиться исключительно врачом соответствующей специальности.

Скрининг рака шейки матки: жидкостная цитология c ВПЧ-тестом (Roche Cobas 4800)

Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию

Жидкостная цитология. Исследование соскоба шейки матки и цервикального канала (окрашивание по Папаниколау)

Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16

Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki 67 (включая жидкостную цитологию — окрашивание по Папаниколау)

Human Papillomavirus низкого (HPV 6, 11, 44) и высокого (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) канцерогенного риска, ДНК (выявление, генотипирование и количественное определение) [реал-тайм ПЦР]

Антиген плоскоклеточной карциномы (SCCA)

Кто назначает исследование?

Литература

Диагностическая ценность иммуноцитохимического метода при ВПЧ-ассоциированных заболеваниях шейки матки. А. Р. Хачатурян, Е. К.Орехова, Г. Х. Толибова, Т. Г. Траль. Журнал акушерства и женских болезней. Выпуск 3, том LXIV, 2015. С. 47-51.

Скрининг рака шейки матки. Взгляд клинициста. Ю. Г. Паяниди, Л. Г. Комарова, В. П. Козаченко, В. В. Кузнецов, А. Ю. Кашурников, К. И. Жорданиа. Онкогинекология, №1, 2013. С. 35-41.

Sahebali S, Depuydt CE, Segers K, Vereecken AJ, Van Marck E, Bogers JJ. Ki-67 immunocytochemistry in liquid based cervical cytology: useful as an adjunctive tool? Journal of Clinical Pathology. 2003;56(9):681-686.

голоса
Рейтинг статьи
Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector